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歐洲關(guān)于牛血清用于生物制品生產(chǎn)的指南(下)

更新時(shí)間:2022-02-28  |  點(diǎn)擊率:762

《歐洲關(guān)于牛血清用于生物制品生產(chǎn)的指南》解讀下篇。


歐洲醫(yī)藥管理局(EMA)關(guān)于牛血清(包括胎牛血清、新生牛血清和小牛血清)用于生物制品生產(chǎn)的管理指南中,也有對外源因子的檢測推薦,下面做一簡要介紹。


  • 細(xì)菌和真菌無菌檢查

按《歐洲藥典》關(guān)于“無菌檢查"的規(guī)定進(jìn)行。


  • 柔膜體的檢查

按《歐洲藥典》關(guān)于“支原體檢查"的規(guī)定進(jìn)行。


  • 是否有bing毒污染的檢查

指南指出,應(yīng)在病毒滅活或祛除之前進(jìn)行病毒檢查。應(yīng)考慮需要檢查的血清樣本量,并且所有檢查應(yīng)進(jìn)行必要的對照和方法驗(yàn)證。


① 常規(guī)病毒的檢查

包括血吸附檢查和細(xì)胞病變效應(yīng)檢查。它應(yīng)采用至少兩種細(xì)胞系:其中一種需要為牛源。

常規(guī)病毒檢查應(yīng)設(shè)置對照,已知血吸附陽性的病毒有副流感病毒3型,細(xì)胞病變效應(yīng)陽性的病毒為牛鼻傳染性氣管炎病毒(IBRV)。用于陰性對照的細(xì)胞應(yīng)使用無病毒污染的血清培養(yǎng)。


②特異病毒的檢查

指南指出,檢查哪種病毒也應(yīng)考慮血清產(chǎn)地所在的病毒流行趨勢。一般來說,應(yīng)考慮對下列病毒進(jìn)行檢查:


藍(lán)舌病毒

(環(huán)狀病毒屬)

及其他相近的環(huán)狀病毒

牛腺病毒

牛細(xì)小病毒

牛呼吸道合胞病毒

牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)

狂犬病毒

呼腸孤病毒3型


③BVDV的檢查

關(guān)于檢測BVDV,指南推薦采用熒光抗體的方法,并認(rèn)為RT-PCR的方法只有有限的價(jià)值。BVDV如果存在,則應(yīng)進(jìn)行定量,并保證其病毒水平在可滅活的范圍之內(nèi)。如果檢測到BVDV,則應(yīng)在采取滅活措施之后再次進(jìn)行檢測,直到再檢測不出病毒。


④ BVDV抗體的檢查

牛血清中的BVDV抗體可能會掩蓋病毒傳染試驗(yàn)中的BVDV的檢測。因而,需要對這類抗體進(jìn)行檢測(方法也要驗(yàn)證),并對它們對BVDV的中和效應(yīng)進(jìn)行評估,對它們“對病毒檢測以及病毒滅活驗(yàn)證的影響"進(jìn)行評估。


⑤其他牛源病毒

指南指出,通過檢測病毒核酸發(fā)現(xiàn),牛多瘤病毒(BPyV)是一種常見污染物。指南鼓勵(lì)生產(chǎn)商或使用者采用傳染性試驗(yàn)(infectivity assays)檢測牛多瘤病毒,并且探索BPyV滅活的方法。

對于其他可能出現(xiàn)的牛源病毒,供應(yīng)商和使用者應(yīng)保持警醒,鼓勵(lì)他們?nèi)フ{(diào)查可能存在的因子以及采取措施去消除或降低它們的存在。


  • 血清的促細(xì)胞生長試驗(yàn)

指南指出,應(yīng)采用合適的細(xì)胞系對每批血清進(jìn)行測試。選擇的細(xì)胞系依賴于最終血清的用途。應(yīng)在病毒滅活后進(jìn)行測試。


  • 病毒的滅活

指南強(qiáng)烈推薦在病毒檢測的基礎(chǔ)上,對血清進(jìn)行病毒滅活。滅活應(yīng)進(jìn)行方法驗(yàn)證。伽馬輻照是常用的滅活措施。指南還對滅活研究的一些細(xì)節(jié)進(jìn)行了說明。

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